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儀器簡介:駿德儀器FD-603.St菌種凍干機是一款實驗室專用菌種活性保存凍干機,。冷阱溫度-85℃,凍干面積0.36m2,隔板溫度范圍:-50℃~+60℃,,值得關注的是板層間距95mm,專門為安剖管的高度而設計,,是研究菌種活性保存凍干的客戶的更好選擇。
菌種凍干機
駿德儀器FD-603.St實驗室專用菌種活性保存凍干機適用于大多數(shù)細菌,、放線菌,、病毒、噬菌體,、立克次體,、霉菌和酵母等的真空冷凍干燥保藏。生物菌種凍干保存步驟,,其操作流程如下:
1,、安瓿管準備
安瓿管材料以中性玻璃為宜。清洗安瓿管時,,先用2%鹽酸浸泡過夜,,自來水沖洗干凈后,用蒸餾水浸泡至pH中性,,干燥后,、貼上標簽,標上菌號及時間,,加入脫脂棉塞后,,121℃下高壓滅菌15-20分鐘,備用,。
2,、保護劑的選擇和準備
保護劑種類要根據(jù)微生物類別選擇。配制保護劑時,,應注意其濃度及pH值,,以及滅菌方法。如血清,,可用過濾滅菌,;牛奶要先脫脂,用離心方法去除上層油脂,,一般在100℃間歇煮沸2-3次,,每次10-30分鐘,備用。
3,、實驗室菌種活性保存凍干機的準備:
駿德儀器 FD-603.St 菌種凍干機 開機備用
4,、凍干樣品的準備
在適宜的培養(yǎng)條件下將細胞培養(yǎng)至靜止期或成熟期,進行純度檢查后(參見科技部自然科技資源平臺聯(lián)合管理辦公室文件《微生物菌種純度檢測技術規(guī)程》(試行)),,與保護劑混合均勻,,分裝。微生物培養(yǎng)物濃度以細胞或孢子不少于108-1010個/ml為宜(以大腸桿菌為例,,為了取得每毫升1010個活細胞菌液2毫升-2.5毫升,,只需10毫升瓊脂斜面兩支)。采用較長的毛細滴管,,直接滴入安瓿管底部,,注意不要濺污上部管壁,每管分裝量約0.1-0.2毫升,,若是球形安瓿管,裝量為半個球部,。若是液體培養(yǎng)的微生物,,應離心去除培養(yǎng)基,然后將培養(yǎng)物與保護劑混勻,,再分裝于安瓿管中,。分裝安瓿管時間盡量要短,在1-2小時內(nèi)分裝完畢并預凍,。分裝時應注意在無菌條件下操作,。
5、預凍
一般預凍2小時以上,,溫度達到-20℃到-35℃左右,。
6、冷凍干燥
采用凍干機進行冷凍干燥,。將冷凍后的樣品安瓿管置于冷凍干燥機的干燥箱內(nèi),,開始冷凍干燥,時間一般為8-20小時,。
終止干燥時間應根據(jù)下列情況判斷:
安瓿管內(nèi)凍干物呈酥塊狀或松散片狀,;
真空度接近空載時的zui高值;
樣品溫度與管外溫度接近,;
選用1-2支對照管,,其水份與菌懸液同量,視為干燥完結,;
選用一個安瓿管,,裝1-2%氯-化鈷,如變深蘭色,可視為干燥完結,;
冷凍干燥完畢后,,取出樣品安瓿管置于干燥器內(nèi),備用,。
7,、真空封口及真空檢驗
將安瓿管頸部用強火焰拉細,然后采用真空泵抽真空,,在真空條件下將安瓿管頸部加熱熔封,。熔封后的干燥管可采用高頻電火花真空測定儀測定真空度。
8,、保藏
安瓿管應低溫避光保藏,。
9、質量檢查
冷凍干燥后抽取若干支安瓿管進行各項指標檢查,,如存活率,、生產(chǎn)能力、形態(tài)變異,、雜菌污染等,。